Hollännesch Fuerscher kombinéieren CRISPR an bioluminescence an engem experimentellen Test firustiechend Krankheeten

En neit entwéckelt Nuetsprotein kéint d'Diagnostik vu virale Krankheeten beschleunegen an vereinfachen, laut Fuerscher an Holland.
Hir Etude, publizéiert Mëttwoch an ACS Publikatiounen, beschreift eng sensibel, eent-Schrëtt Method fir séier Analyse viral Nukleinsäuren an hir Erscheinung mat helle hell blo oder gréng Proteinen benotzt.
D'Identifikatioun vu Pathogenen andeems se hir Nukleinsäure Fangerofdréck z'entdecken ass eng Schlësselstrategie an der klinescher Diagnostik, biomedizinescher Fuerschung, a Liewensmëttel- an Ëmweltsécherheetsiwwerwaachung.Déi wäit benotzt quantitativ Polymerase Kettenreaktioun (PCR) Tester sinn héich sensibel, awer erfuerderen raffinéiert Probepräparatioun oder Interpretatioun vu Resultater, wat se onpraktesch mécht fir e puer Gesondheetsariichtungen oder Ressourcebegrenzten Astellungen.
Dëse Grupp aus Holland ass d'Resultat vun enger Zesummenaarbecht tëscht Wëssenschaftler vun Universitéiten a Spideeler fir eng séier, portabel an einfach ze benotzen Nukleinsäure-Diagnosmethod z'entwéckelen, déi a verschiddenen Astellungen applizéiert ka ginn.
Si goufen inspiréiert vu Feierblummen, Feierblummen a klenge Stäre vum aquatesche Phytoplankton, all ugedriwwe vun engem Phänomen genannt Biolumineszenz.Dëse Glow-in-the-Dark Effekt gëtt duerch eng chemesch Reaktioun verursaacht, déi de Luciferase Protein involvéiert.D'Wëssenschaftler hunn Luciferase-Proteine ​​a Sensoren agebaut, déi Liicht emittéieren fir d'Observatioun ze erliichteren wann se en Zil fannen.Och wann dëst dës Sensoren ideal mécht fir Point-of-care Detektioun, feelen se de Moment déi héich Sensibilitéit déi néideg ass fir klinesch diagnostesch Tester.Wärend d'CRISPR Gen Editéierungsmethod dës Fäegkeet ubitt, erfuerdert vill Schrëtt an zousätzlech spezialiséiert Ausrüstung fir dat schwaacht Signal z'entdecken, dat a komplexen, lauter Proben präsent ka sinn.
D'Fuerscher hunn e Wee fonnt fir e CRISPR-relatéierte Protein mat engem biolumineszent Signal ze kombinéieren deen mat enger einfacher Digitalkamera erkannt ka ginn.Fir sécherzestellen datt et genuch RNA oder DNA Probe fir Analyse war, hunn d'Fuerscher Rekombinase Polymerase Amplifikatioun (RPA) gemaach, eng einfach Technik déi bei enger konstanter Temperatur vu ronn 100 ° F funktionnéiert.Si hunn eng nei Plattform mam Numm Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) entwéckelt, an deem déi zwee CRISPR/Cas9 Proteine ​​​​spezifesch sinn fir verschidde kontinuéierlech Portiounen vum virale Genom, jidderee mat engem eenzegaartege Luciferase-Fragment uewe verbonnen.
Wann de spezifesche virale Genom d'Enquêteuren ënnersicht ass präsent, binden zwee CRISPR / Cas9 Proteinen un d'Zilnukleinsäure Sequenz;si ginn an der Noperschaft, et erlaabt intakt Luciferase-Protein ze bilden an e bloe Liicht an der Präsenz vun engem chemesche Substrat auszeginn..Fir de Substrat, deen an dësem Prozess verbraucht gëtt, ze berechnen, hunn d'Fuerscher eng Kontrollreaktioun benotzt, déi gréng Luucht emittéiert.E Röhre deen d'Faarf vu gréng op blo ännert weist e positiven Resultat un.
D'Fuerscher hunn hir Plattform getest andeems de RPA-LUNAS Assay entwéckelt, deen detektéiertSARS-CoV-2 RNAouni langweileg RNA Isolatioun, a bewisen seng diagnostesch Leeschtung op Nasopharyngeal Swab Proben ausCOVID 19Patienten.RPA-LUNAS huet erfollegräich SARS-CoV-2 bannent 20 Minutte festgestallt a Proben mat enger RNA viraler Belaaschtung esou niddereg wéi 200 Exemplare / μL.
D'Fuerscher gleewen datt hir Assay einfach an effektiv vill aner Viren erkennen kann."RPA-LUNAS ass attraktiv fir point-of-care infektiiv Krankheet Tester," si geschriwwen.